Подготовка образца: 

Для твёрдых образцов  
Гомогенизировать 50 г исследуемого образца с 450 мл подходящего разбавителя (например, фосфатный буфер Баттерфилда, солевой раствор с добавлением фосфатного буфера, физиологический раствор или вода) в гомогенизаторе.
В случае необходимости приготовить серию десятикратных разведений.

Для жидких образцов
Жидкий образец можно добавить непосредственно на подложку. При необходимости следует довести pH образца до нейтрального значения (pH 7,0±0,2).

Проведение испытания

Основные этапы

1. Откройте фольгированный пакет и извлеките подложку MC-Media Pad.
    При необходимости, запишите нужную информацию на защитной пленке.

2. Поднимите прозрачную защитную пленку и пипеткой нанесите 1,0 мл раствора образца на подложку.
    Рекомендуется поднимать защитную пленку по диагонали для простого и надежного повторного закрывания.

3. Опустите пленку и слегка прижмите её по краям, чтобы плотно закрыть подложку.

4. Инкубируйте подложку при температуре 37±1°C в течение 24±2 часов.
    Учесть результаты - подсчитать выросшие на подложке колонии (см. Интерпретация результатов).

5. Запечатайте открытый фольгированный пакет и храните при температуре 2-15°C до 4 недель.

Интерпретация результатов

Для определения числа колиформных бактерий подсчитайте все окрашенные  колонии
(сине-зелёного/голубого и красно-пурпурного/ тёмно-синего цвета) вне зависимости от интенсивности окраски.

Для подсчёта E.coli следует учитывать только колонии красно-пурпурного/тёмно-синего цвета.

Для подсчета большого количества колоний можно подсчитать число колоний в одном квадратике разметочной сетки
и умножить полученное значение на 20.

Если проба сильно загрязнена – на подложке может быть сплошной рост микроорганизмов.
В этом случае сложно посчитать колонии. Тогда следует провести разбавление образца и повторить анализ.
При необходимости можно взять колонию с подложки с помощью стерильной петли для последующего анализа.

Примечание

- Методика испытания разработана для персонала отдела контроля качества и иных сотрудников,
  обладающих компетенцией в области исследования образцов, потенциально загрязненных
  кишечной палочкой и колиформными бактериями.

- Необходимо использовать средства индивидуальной защиты, такие как перчатки, лабораторный халат и очки.
  С образцами и обсеменёнными материалами следует обращаться как с источником потенциальной биологической опасности.

- Перед использованием изделия необходимо внимательно ознакомиться с инструкцией.

- Оставшиеся после вскрытия фольгированного пакета неиспользованные подложки следует хранить
  в фольгированном пакете, запечатанном клейкой лентой, в прохладном (2-15°C) месте.
  После открытия пакета необходимо использовать все подложки в течение 1 месяца.

- Подложки не следует подвергать действию солнечного света или ультрафиолетового излучения.

- Не следует использовать изменившие цвет или поврежденные подложки.

- Образование складок на подложке не должно оказывать влияния на обнаружение.

- Наличие небольших фрагментов ткани на подложке или около нее  не должно оказывать влияния на обнаружение.

- Не следует использовать подложки по истечении срока годности.
  Качество подложек с истекшим сроком годности не гарантируется.

- Предел измерения составляет 300 КОЕ на подложку.
  Если при подсчете на подложке обнаружено более 300 КОЕ, рекомендуется провести разбавление образца.

- Природа пищевого продукта (вязкие образцы или наличие пищевого красителя) может влиять на результаты исследования. 
  В этом случае следует устранить причины искажения путем разбавления образца или иными способами.

- Используемые инструменты и материалы должны быть обеззаражены путем автоклавирования или кипячения.
  Утилизацию материалов следует проводить согласно требованиям местных стандартов, регулирующих обработку отходов.