Хромогенная среда РАМБАХ-агар позволяет дифференцировать энтеробактерии  по цвету колоний и быстро выявлять сальмонеллы. Сальмонеллы ферментируют специфический субстрат – пропиленгликоль до кислоты. рН-индикатор среды окрашивает колонии сальмонелл в красный цвет. Колиформные бактерии образуют сине-зеленые колонии. Shigella и Proteus образуют бесцветные, слегка желтоватые колонии. Дезоксихолат натрия ингибирует рост сопутствующих грамположительных бактерий. 

Исследуемый образец проходит этап селективного обогащения на среде для выделения сальмонелл и затем высевается на ¼ чашки с РАМБАХ-агаром. Инкубация в аэробных условиях при 37^оС. Учет результатов через 24 часа. Специфичность ферментативных реакций обеспечивает высокую точность результатов.

РАМБАХ-агар позволяет идентифицировать сальмонеллы с 99% специфичностью и 97-99% чувствительностью.

Инструкция

РАМБАХ-агар – RAMBACH agar for the identification of Salmonella

Кат.№ 100188.0002, упаковка (4 флакона) для приготовления 250 мл Рамбах агара

Рамбах-агар – хромогенная дифференциально-диагностическая среда для идентификации сальмонелл в пищевых продуктах, сырье и клиническом материале.

Принцип

Питательные вещества РАМБАХ-агара обеспечивают быстрый рост энтеробактерий. Дезоксихолат натрия ингибирует сопутствующую грамположительную микрофлору. Сальмонеллы продуцируют кислоту из пропиленгликоля, в результате чего происходит изменение рН-среды, и колонии сальмонелл окрашиваются в красный цвет. Для дифференциации сальмонелл от колиформных бактерий в состав среды включена хромогенная смесь, которая выявляет наличие фермента ß–галактозидазы – характерного фермента колиформных бактерий. Колиформные бактерии растут в виде сине-зеленых или сине-фиолетовых колоний. Остальные энтеробактерии и грамотрицательные бактерии, такие как Proteus, Pseudomonas, Shigella вырастают в виде бесцветных-желтоватых колоний. РАМБАХ-агар обеспечивает однозначную дифференциацию сальмонелл от других бактерий.

Состав среды (г/л)

Пептон 8.0; хлорид натрия 5.0; дезоксихолат натрия 1.0; хромогенная смесь 1.5; пропиленгликоль 10.5; агар-агар 15.0.

Приготовление среды

Добавить 1 флакон жидкой хромогенной смеси среды к 250 мл дистиллированной воды и перемешать до полного растворения. Добавить 1 флакон порошка среды (питательная основа), дать среде набухнуть в течение 20-30 минут; перемешать до полного растворения. Не должно быть кристалликов агара на стенках колбы. Колбу со средой нагревать на кипящей водяной бане с периодическим помешиванием. Среда полностью растворяется. Стандартное время до полного растворения для 250 мл – 20-25 мин. Среду не перегревать! Не автоклавировать, не перегревать среду!

Охладить среду как можно быстрее на водяной бане 45-50^оС. Во время этой процедуры (максимум 30 минут) следует помешивать среду время от времени. Разлить по чашкам. Для предотвращения образования осадка следует разместить чашки Петри на охлажденной поверхности стола (максимум 25^оС). Готовые чашки со средой опалесцируют и слегка розовые. Перед посевом чашки следует подсушить. рН: 7.3±0.2 при 25^оС. Срок годности и условия хранения готовых чашек - в холодильнике (ниже 6^оС) закрытые в пластиковых пакетах – 3 месяца.

Ход исследования

После этапа селективного обогащения посеять на ¼ поверхности агара петлей. Для того чтобы получить изолированные колонии – той же петлей посеять на оставшуюся поверхность чашки. Инкубировать в аэробных условиях 24-48 часов при 35-37^оС.

Учет результатов

Цвет колоний микроорганизмов на Рамбах агаре