Питательная среда Мерк Миллипор (Merck Millipore)

Контрастное изменение цвета среды

Среда Fluorocult^® LMX позволяет одновременно определять колиформные бактерии и E.coli в исследуемых образцах – смывы, сырье, готовая продукция.

Колиформные бактерии и E.coli  выявляют по наличию специфических ферментативных активностей с использованием флюорогенных и хромогенных субстратов.

Колиформные бактерии в отличие от других грамотрицательных бактерий расщепляют хромогенный субстрат X-GAL благодаря наличию специфического фермента – ß-галактозидазы, в результате чего цвет среды меняется со светло-желтого на сине-зеленый.

E.coli расщепляет флюорогенный субстрат MUG благодаря наличию специфического фермента - ß-глюкуронидазы. В результате образуется флюоресцирующий в УФ-свете (366 нм) продукт реакции.

Проведение индольного теста с реактивом Ковача позволяет со 100% надежностью выявить E.coli.

Преимущества:
- Одновременное определение колиформ и E.coli   в одной пробирке.
- Простой учет результатов.
- Контрастное изменение цвета среды или флюоресценция среды в УФ-свете. 
- Экспрессность. Результаты идентификации E.coli готовы через 18-24ч!
  На 3-4 дня быстрее по сравнению с классическим методом исследования. 
- Специфичность ферментативных реакций обеспечивает высокую точность результатов. 
- Снижение трудозатрат и расходных материалов.

Среда Fluorocult LMX одобрена ФГУЗ Центром Гигиены и Эпидемиологии Роспотребнадзора (МР №24ФЦ/513) и разрешена к применению в лабораториях санитарно-эпидемиологической службы, осуществляющих государственный и ведомственный контроль, а также в производственных и клинических лабораториях.

Инструкция

Хромогенная среда LMX по Манафи и Осмеру на колиформы и E.coli – LMX broth modified acc. to MANAFI and OSSMER for microbiology Fluorocult^®

Кат.№ 110620.0500, Упаковка – 500 г

Селективная среда для одновременного определения общих колифомных бактерий и E.coli в воде и продуктах

Fluorocult LMX-бульон предложен MANAFI и KNEIFEL в 1989 г., впоследствии модифицирован, в результате чего повысилась не только чувствительность среды, но и сократилось время исследования до 24 часов. Отличные питательные свойства среды (пептон и фосфатный буфер) обеспечивают быстрый рост колиформных бактерий. В то же время лаурилсульфат в значительной степени ингибирует рост грам-положительных бактерий.  Наличие в среде хромогенного субстрата 5-бромо-4-хлоро-3-индолил-b-D-галактопиранозида (X-GAL), который расщепляется колиформами, и флюорогенного субстрата 4-метилумбеллиферил-b-D-галактопиранозида (MUG), который является высокоспеци­фичным для E.coli, делает возможным одновременное определение как колиформных бактерий, так и E.coli. Сине-зеленый цвет среды указывает на наличие в образце колиформ, а флюоресценция среды в УФ-свете при 366нм указывает на присутствие E.coli. Среда содержит триптофан, что делает возможным проведение индольного теста и окончательное подтверждение E.coli. Синтез характерного для колиформных бактерий фермента - b-D-галактозидазы усиливается за счет наличия в среде индуктора – 1-изопропил-b-D-1-тио-галактопиранозида (IPTG).

Состав (г/л): триптоза 5.0; хлорид натрия 5.0; сорбитол 1.0; триптофан 1.0; гидрофосфат калия 2.7; дигидрофосфат калия 2.0; лаурилсульфат натрия 0.1; X-GAL 0.08; MUG 0.05; IPTG 0.1.

Приготовление
Растворить 17.0 г среды в 1 л дистиллированной воды, нагреть до кипения. Разлить среду по пробиркам. Автоклавировать 15 мин при 121^оС. Приготовленная среда прозрачная светло-желтая. рН: 6.8±0.2 при 25^оС.

Условия хранения: при комнатной температуре – 6 месяцев. При хранении ниже +15^оС может образоваться осадок, однако это не влияет на результаты тестирования.

Ход исследования: зависит от образцов (пищевые продукты или вода). Инкубировать 24 часа при 35^оС.

Учет результатов:

Колиформные бактерии: изменение цвета среды со светло-желтого на сине-зеленый, даже если изменение цвета произошло в верхней части пробирки (флакона), подтверждает наличие колиформных бактерий в исследуемом образце (реакция с X-GAL). 

E.coli: проверить флаконы, в которых произошло изменение цвета среды на сине-зеленый. Посветить на пробирку (флакон) УФ-лампой. Светло-голубая флюоресценция указывает на наличие E.coli (реакция с MUG). Внимание: защищайте глаза от прямого УФ-света! Для подтверждения E.coli в пробирки (флаконы), в которых среда флюоресцирует наслоить реагент Ковача (индольный тест). Образование красного кольца указывает на положительный индольный тест и подтверждает наличие E.coli в образце.