ТЕСТ ЛАТЕКСНОЙ АГГЛЮТИНАЦИИ ДЛЯ ПОДТВЕРЖДЕНИЯ/ИДЕНТИФИКАЦИИ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ СТАФИЛОКОККОВ MICROGEN STAPH (M43)

Быстрый    2    мин.   тест   для    подтверждающей    идентификации   коагулазоположительных стафилококков (в т.ч. Staphylococcus aureus) с первичной среды.

Латексный реагент представляет собой суспензию полистироловых латексных частиц, покрытых фибриногеном (связь с коагулазой) и IgG (связь с протеином А). Если в суспензии присутствуют коагулаз/протеин А- положительные стафилококки, происходит реакция агглютинации латекса- образование комочков, склеивание, которое наблюдается невооруженным глазом.

Реакция наблюдается в течение 2 мин. Частицы латекса крупные, вследствие чего агглютинация хорошо различима на черном тестовом поле.

Состав набора:

1.Латексный реагент М43а (флакон 5,0 мл, голубая крышка)- 1 шт./5 шт.(на 100/500 тестов) 2.Положительный контроль M43b (флакон 1,0 мл, черная крышка)- 1 шт./2 шт.

3.Реакционные слайды

4.Палочки пластмассовые для перемешивания 5.Инструкция по использованию

Условия хранения:

Все реагенты набора необходимо хранить при температуре 2-8°С. Не используйте реагенты после даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Примечания

1.Все реагенты необходимо довести до комнатной температуры перед использованием. 2.Не разводите какие-либо реагенты.

3.Не смешивайте реагенты набора.

4.Не допускайте замораживания реагентов набора.

5.Не касайтесь пипетками и капельницами положительного контроля и образца на слайде. 6.Убедитесь перед использованием, что реакционный слайд чистый и сухой.

7.Считайте положительным результатом только агглютинацию-образование комочков. Образование творожистой массы или волокон нельзя считать положительным результатом.

Контроль качества

Контроль должен проводиться каждый раз при использовании набора.

1. Положительный контроль. Добавьте 1 каплю Положительного контроля М43b на одно из полей слайда. Несколько раз переверните флакон с Латексным реагентом (М43а). Добавьте 1 каплю Латексного реагента (М43а) в то же поле слайда. Не касайтесь пипеткой флакона латексного реагента капли положительного контроля на слайде! (во избежание контаминации). Перемешайте тщательно пластиковой палочкой (в комплекте) и распределите по полю слайда. Покачайте слайд в течение 2 мин. Должна наблюдаться видимая агглютинация. Если агглютинация отсутствует, необходимо использовать новый набор.

2. Отрицательный контроль. Несколько раз переверните флакон с Латексным реагентом (М43а). Добавьте 1 каплю Латексного реагента (М43а) в одно из полей слайда. Отберите отдельную колонию суточной культуры известного подтвержденного коагулаз/протеин А- отрицательного стафилококка (например, S.epidermidis) и растворите ее в капле латексного реагента на слайде. Покачайте слайд в течение 2 мин. Агглютинация должна отсутствовать.

Процедура теста

1. Несколько раз переверните флакон с Латексным реагентом (М43а) для перемешивания и добавьте 1 каплю этого реагента в одно из полей слайда.
2. Используя бактериологическую петлю, отберите 1 колонию тестируемой культуры с поверхности агара и растворите ее в капле Латексного реагента на слайде.
3. Перемешайте латексный реагент с колонией пластиковой палочкой (в комплекте). Покачайте слайд.
4. Наблюдайте наличие или отсутствие процесса агглютинации в течение не более, чем 2 мин.

Видимая агглютинация частиц латекса, образование комочков- результат положительный.

Отсутствие процесса агглютинации, суспензия без комочков- результат отрицательный.

Ограничения в использовании теста

1.Используйте для теста только чистые отдельные колонии. 2.Культуры старше 30 ч. могут вызвать автоагглютинацию.

3.Среды, содержащие большое количество соли (такие как Солевой агар с маннитолом) могут ингибировать продукцию протеина А, и это может привести к ложноотрицательным результатам.

4.R-штаммы стафилококков могут стать причиной ложноположительного результата. Эти штаммы редки и хорошо отличимы по морфологии колоний. Если такие штаммы подозреваются, это необходимо подтвердить растворением колонии в капле солевого раствора и тестированием суспензии.

5.Образование волокнистого вещества не может считаться положительным результатом. При получении такого результата, его необходимо подтвердить биохимическими тестами. 6.Некоторые грибы могут стать причиной ложноположительного результата.

7.Все коагулазположительные штаммы стафилококка будут давать положительный результат с тестом Микроген Staph (M43,433). Поэтому S.aureus не будет дифференцироваться от S.intermedius и S.hyicus.

8.Идентификация с помощью теста латексной агглютинации предварительна. Все положительные результаты должны быть подтверждены другими идентификационными тестами.