ТЕСТ ЛАТЕКСНОЙ АГГЛЮТИНАЦИИ ДЛЯ ПОДТВЕРЖДЕНИЯ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ ЛИСТЕРИЙ MICROGEN LISTERIA (F48)

 Быстрый 2 мин. тест для подтверждения/предварительной идентификации бактерий рода Listeria с селективной плотной среды.

Тестовый реагент представляет собой суспензию полистироловых латексных частиц, покрытых поливалентной антисывороткой (против жгутиковых антигенов Listeria). Если образец содержит какие-либо виды Listeria, происходит реакция агглютинации латекса- образование комочков, склеивание, которое наблюдается невооруженным глазом. С помощью теста идентифицируются все подвижные виды Listeria.

Реакция наблюдается в течение 2 мин. Частицы латекса крупные, вследствие чего агглютинация хорошо различима на черном тестовом поле.

Состав набора:

1.Латексный реагент F48a (флакон 2,5 мл)- 1 шт.(на 50 тестов)

2.Положительный контроль F48b (флакон 0,5 мл)- 1 шт.

3.Изотонический солевой раствор 0,85% NaCl F40 (флакон 5,0 мл)- 1 шт.

4.Реакционные слайды

5.Палочки пластмассовые для перемешивания

6.Инструкция по использованию

Условия хранения:

Все реагенты набора необходимо хранить при температуре 2-8°С. Не используйте реагенты после даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Примечания

1.Все реагенты необходимо довести до комнатной температуры перед использованием. 2.Не разводите какие-либо реагенты.

3.Не смешивайте реагенты набора.

4.Не допускайте замораживания реагентов набора.

5.Убедитесь перед использованием, что реакционный слайд чистый и сухой.

6.Считайте положительным результатом только агглютинацию-образование комочков.

Образование творожистой массы или волокон нельзя считать положительным результатом.

Контроль качества

Контроль должен проводиться каждый раз при использовании набора.

1.Контроль реагентов. Добавьте 1 каплю латексного реагента F48а и 1 каплю солевого раствора F40 на одно и тоже поле слайда. Перемешайте тщательно пластиковой палочкой (в комплекте) и распределите по полю слайда. Покачайте слайд в течение 1 мин. Если наблюдается агглютинация, значит латексный реагент или солевой раствор контаминированы и не могут использоваться.

2.Положительный контроль. Добавьте 1 каплю положительного контроля F48b в одно из полей слайда. Добавьте в то же поле 1 каплю латексного реагента F48а. Не касайтесь пипеткой флакона латексного реагента капли положительного  контроля на слайде!  (во избежание  контаминации).

Перемешайте пластиковой палочкой (в комплекте). Покачайте слайд. В течение 2 мин. должна наблюдаться агглютинация. Если агглютинации не наблюдается, используйте новый набор.

Предварительные процедуры (рекомендуются)

1.Проведите тест на оксидазу. Листерии являются оксидазоотрицательными микроорганизмами.

2.Изучите форму колонии. Данный тест может быть использован только для S-штаммов.

3.Максимальное количество жгутиковых антигенов образуется при 30°С, поэтому желательно проводить выделение культуры при этой температуре.

Процедура теста

1. Добавьте 1 каплю солевого раствора F40 на одно из полей слайда.
2. Используя палочку для перемешивания или бактериологическую петлю, отберите 1 колонию тестируемой культуры с поверхности агара и растворите ее в капле солевого раствора на слайде (используйте для теста только колонии, имеющие морфологию, характерную для бактерий рода Listeria).
3. Покачайте слайд в течение 2 мин. Если не наблюдается агглютинации, приступите к следующему шагу (т.к. штаммы R-колоний могут дать ложноположительный результат).
4. Несколько раз переверните флакон с латексным реагентом (F48а). Добавьте 1 каплю этого реагента в поле слайда с бактериальной суспензией. Не касайтесь пипеткой флакона латексного реагента суспензии на слайде! (во избежание контаминации).
5. Перемешайте латексный реагент с суспензией пластиковой палочкой (в комплекте). Покачайте слайд 2-3 раза, интенсивное продолжительное покачивание необязательно.
6. Наблюдайте наличие или отсутствие процесса агглютинации в течение не более, чем 2 мин.

Результат:

Видимая агглютинация частиц латекса, образование комочков- результат положительный.

Отсутствие процесса агглютинации, суспензия без комочков- результат отрицательный.

Ограничения в использовании теста

1.R-штаммы Listeria могут давать в результате неспецифическую агглютинацию и, поэтому не могут использоваться для данного теста.

2. Культуры, выросшие при температуре более, чем 30°С, могут не образовывать жгутиковых антигенов и, вследствие этого дать ложноотрицательный результат. 3.Неподвижные штаммы не детектируются данным тестом.

4.Некоторые     виды     стафилококков     и    грамположительные     бациллы                              могут    давать ложноположительный результат.

5.Идентификация с помощью теста латексной агглютинации предварительна. Все положительные результаты должны быть подтверждены другими идентификационными тестами.